Neigiamas dažymo pagrindas, technika, privalumai ir trūkumai

The neigiamas dažymas Tai specialus dažymo metodas, skirtas pabrėžti kapsulės buvimą kai kuriuose mikroorganizmuose Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae ir Cryptococcus neoformans-, iš klinikinių mėginių ar grynų kultūrų.

Tiesioginis mėginys, dažnai naudojamas neigiamam dažymui, yra smegenų skystis. Šis metodas yra greita alternatyva įtariamai meningito diagnozei, ypač Cryptococcus neoformans.

Taip pat ši dėmė gali būti taikoma apskritai skrepliams ir steriliems skysčiams, taip pat štamai, gauti iš jaunų grynų kultūrų. Šis metodas atlieka nigrosiną arba kinišką rašalą jo vykdymui; todėl yra labai paprasta ir ekonomiška metodika, kuri per trumpą laiką teikia didelę diagnostinę informaciją.

Šia prasme bet kuri laboratorija gali atlikti šią spalvą. Žinoma, laboratorijoje turi būti kompetentingas personalas, galintis atpažinti raugą Cryptococcus neoformans izoliuoti arba veržti ir atskirti juos nuo leukocitų ir artefaktų, kuriuos gali pateikti mėginys.

Indeksas

• 1 Fondas
• 2 Technika
  • 2.1 Medžiagos
  • 2.2 Mėginių ėmimo specifikacijos
  • 2.3 Technikos vykdymas su tiesioginiais mėginiais
  • 2.4. Technikos vykdymas, naudojant kultūrą
  • 2.5 Stebėjimas mikroskopu
• 3 Privalumai
• 4 Trūkumas
• 5 Audinių dažymas Indijos rašalu
• 6 Nuorodos

Fondas

Nigrosinas ir Indijos rašalas veikia panašiai; todėl viena iš šių dviejų medžiagų gali būti naudojama pakaitomis.

Šis metodas vadinamas neigiamu dažymu, nes jis veikia priešingai nei kiti dažymo būdai. Tai, kas išlieka nepakitusi, yra struktūra, kuri yra ieškoma arba kurią norite matyti; tai yra, mikroorganizmai.

Todėl dažymas grindžiamas tepalo dugno dažymu tamsioje spalvoje. Šiuo atveju ribotos struktūros bus paryškintos šviesiai arba bespalviai.

Apskritai, mielės yra stebimos, todėl jas supa skaidrus halonas, atitinkantis kapsulę. Taip atsitinka todėl, kad Kinijos rašalas ir nigrosinas yra medžiagos, kurios negali prasiskverbti į polisacharidą, kuris sudaro gyvų mikroorganizmų kapsulę..

Verta pažymėti, kad kitos struktūros, kurios gali būti tiesioginiame mėginyje, pvz., Leukocitai arba raudonieji kraujo kūneliai, neprasiskverbia.

Dabar, jei mikroorganizmai yra negyvi, tinktūra gali įsiskverbti į juos taip, kad šis dažymas būtų naudingas ir mikroorganizmų gyvybingumui įvertinti..

Technika

Medžiagos

Nigrosinas

Nigrosinas savo pavadinimą skolina juodos spalvos spalva. Tai sintetinė medžiaga, gaunama kaitinant organinių junginių, tokių kaip nitrobenzinas, anilinas ir anilino hidrochloridas, mišinį, naudojant minėtos reakcijos katalizatorių (geležį arba varį)..

Kinijos rašalas

Kinijos rašalas yra medžiaga, kurią daugiausia naudoja azijiečiai rašymui, meno kūriniams gaminti ir monochromatiniam dažymui. Tai labai populiarus kinų kultūroje.

Jis gaunamas iš kalmarų rašalo, sumaišyto su miltelių anglimi, mažai dervingų medžių deginimo produktas.

Taip pat galima paruošti jį iš angliavandenilių (augalinių aliejų) deginimo suodžių ir baltymų želatinos, kuri suteikia jai tinkamą konsistenciją, kad būtų išvengta anglies dalelių nusodinimo.

Ėminių ėmimo specifikacijos

- Nereikalauja nevalgius.

- CSF, skreplių ar sterilaus skysčio mėginyje turi būti ne mažiau kaip 1 ml tūrio ir nedelsiant laboratorijoje turi būti pernešama į kambario temperatūrą..

- KSF ir sterilius skystus mėginius turi paimti specialistas.

- Jis taip pat gali būti gryna įtariamo štamo, susijusio su minėtais patogenais, kultūra.

Technikos vykdymas su tiesioginiais mėginiais

- Mėginiai turi būti centrifuguojami, tada supernatantas pašalinamas ir nuosėdos paimamos.

- Ant švaraus stiklelio dedamas centrifuguotos medžiagos (nuosėdų) lašas ir lašas Kinijos rašalo arba nigrosino..

- Ji turi būti gerai sumaišoma ir padengta dangteliu, kad lašas galėtų plisti kaip plona plėvelė, neviršijant kraštų.

- Vėliau preparatas montuojamas mikroskopu.

- Jei preparatas yra per tamsus, jis gali būti atskiestas vandeniu.

Technikos vykdymas, naudojant kultūrą

- Labai maža dalis jaunų pasėlių yra paimama sėklų adata ir ištirpinama lašeliu Kinijos rašalo, kuris anksčiau buvo uždėtas ant švarios skaidrės.

- Viršuje yra dangtelis.

- Jis stebimas mikroskopu 10X ir 40X.

Taip pat galite ištirpinti kolonijos dalį distiliuotame vandenyje, iš ten paimti lašą ir sumaišyti su rašalu. Tokiu būdu preparatas nebus toks storas, kad būtų galima stebėti struktūras atskirai; Jei yra aglomeracijų, tai nebus gerai stebima.

Kita metodika yra tokia:

- Viename slankio gale supilkite suspensijos kultūros lašą.

- Į tą pačią vietą įpilkite nigrosino lašą ir sumaišykite.

- Naudodami kitą skaidrę, ištraukite mėginį taip, lyg darote hematologinį tepinėlį.

- Leiskite išdžiūti ir stebėkite po mikroskopu.

Stebėjimas mikroskopu

Pirmiausia turite sutelkti dėmesį į 10X tikslą, kad galėtumėte plačiai matyti lauką. Vėliau turėtumėte ieškoti, jei yra aiškių erdvių; jei yra, fokusuokite su 40X, kad pamatytumėte detales.

Privalumai

- Tai lengva atlikti.

- Tai ekonominė technika.

- Šis metodas nereikalauja, kad tepinėlis būtų pritvirtintas prie šilumos ar cheminių medžiagų; todėl mikroorganizmai stebimi be iškraipymų.

- Šviežią preparatą nereikia išdžiovinti, todėl jį galima nedelsiant stebėti ir greitai gauti rezultatus.

Trūkumas

Surinkus šviežius preparatus reikia nedelsiant stebėti; Jei jiems leidžiama išdžiūti, jų nebegalima stebėti ir naują.

Audinių dažymas Indijos rašalu

Kita funkcija, kurią gali atlikti Kinijos rašalas, yra patologijos laboratorijose. Tai taikoma chirurgiškai pašalintiems audinių mėginiams, siekiant pažymėti naviko rezekcijos ribas.

Pažymėtas audinys purškiamas acto rūgštimi. Tai veikia kaip pavojus ir neleidžia rašalui išeiti, kai audinys yra apdorojamas įprastai biopsijos paruošimui..

Procedūra susideda iš audinių plaukimo alkoholyje ir ksilene, o po to įpilant parafino. Šis ženklinimas patologui vadovauja stebėdamas audinį, nurodydamas, kur yra chirurginės rezekcijos ar kitos lankytinos vietos skirtumas.

Nuorodos

1. „Nigrosina“. Vikipedija, laisva enciklopedija. 2017 m. Liepos 11 d., 22:46 UTC. 2019 m. Sausio 6 d., 16:56: en.wikipedia.org
2. „Kinų rašalas“. Vikipedija, laisva enciklopedija. Spalio 1, 2018, 03:08 UTC. 2019 m. Sausio 6 d., 18:20: en.wikipedia.org/
3. Silva L, Silva C, Fernández N, Bueno C, Torres J, Rico M, Macías J ir bendradarbiai. (2006). Ekstremadūros autonominio regiono darbo personalas. Specialioji darbotvarkė IV tomas. Redakcinis MAD. Sevilija – Ispanija, p. 211-212.
4. Silva M, García M, Corrales J, Ponce E. (2006), Galicijos sveikatos tarnybos (SERGAS) specialistų laboratorijos technikas. Dalyko apimtis 2. Redakcinis MAD. Sevilija – Ispanija, p. 79-80.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Bailey & Scott mikrobiologinė diagnozė. 12 red. Argentina Panamericana S.A Redaktorius