Biocheminių bandymų tipai, kokie jie yra ir svarbūs

The biocheminiai tyrimai mikrobiologijoje jie yra cheminių bandymų, atliekamų mėginyje esančių mikroorganizmų, rinkinys, siekiant juos identifikuoti; Šie mikroorganizmai paprastai yra bakterijos. Mikrobiologui yra daug biocheminių tyrimų.

Tačiau šių bandymų pasirinkimas grindžiamas preliminariais duomenimis, pvz., Gramo dėmių ir augimo simboliais, kurie leidžia bakterijoms priskirti tam tikrą kategoriją. Biocheminiai tyrimai daugiausia grindžiami kiekvieno tipo bakterijų metabolinėmis savybėmis. 

Ne visos bakterijos turi tas pačias savybes, todėl tiriama, ar jie turi tam tikrą fermentą, pridedant substratą ir laukdami reakcijos. Paprastai šis nustatymas nustatomas pasikeitus spalvai arba pH auginimo terpėje.

Bakterijai patikimai identifikuoti iki rūšies lygio dažnai reikia mažiau nei 15 biocheminių bandymų. Daugiau biocheminių bandymų gali padidinti pasitikėjimą identifikavimu.

Dauguma šių biocheminių tyrimų atliekami serume arba kraujo plazmoje. Tačiau jie gali būti atliekami ir kitose biologinėse sekcijose, pvz., Šlapime, smegenų skystyje, pleuros skystyje ir išmatose..

Indeksas

• 1 Klasifikacija
  • 1.1 Universalus
  • 1.2 Diferencialai
  • 1.3
• 2 Biocheminių bandymų tipai
  • 2.1 Katalazės bandymas
  • 2.2 Oksidazės bandymas
  • 2.3 Sūdyto manitolio agaro (MSA) bandymas
  • 2.4 Koagulazės tyrimas
  • 2.5 Ureazės tyrimas
• 3 Kokie yra biocheminiai tyrimai??
• 4 Svarba
• 5 Nuorodos

Klasifikacija

Biocheminius tyrimus galima suskirstyti į 3 grupes:

Universalus

Tai yra bandymai, kuriuos galima atlikti bet kuriam mėginiui ir kurie padeda mikrobiologui atlikti šiuos biocheminius bandymus, kurie turi būti atlikti siekiant gauti patikimą identifikavimą..

Pavyzdys

Katalazės ir oksidazės testas.

Diferencialai

Tai yra bandymai, atliekami mėginyje esančių mikroorganizmų identifikavimui iki rūšies lygio.

Identifikavimas atliekamas remiantis bandymų derinio rezultatais, nes individualūs rezultatai nėra pakankamai informatyvūs, kad būtų galima identifikuoti.

Pavyzdys

IMViC bandymai ir cukraus panaudojimo bandymai.

Specifinis

Jie yra konkretūs tam tikros rūšies bandymai arba rūšies potipis. Šie bandymai paprastai atliekami tam, kad patvirtintumėte arba nustatytumėte porūšio lygiu. Individualūs testai yra informatyvūs.

Pavyzdys

Γ-glutamilo aminopeptidazės tyrimas.

Biocheminių bandymų tipai

Katalazės testas

Katalazės tyrimas yra bandymas, rodantis katalazės fermento buvimą, išskiriant vandenilio peroksidą į deguonį ir vandenį. Nedidelis bakterijų kiekis pridedamas prie vandenilio peroksido lašelio (3%) ant stiklelio.

Katalazinis tyrimas yra paprastas mikrobiologų tyrimas, skirtas padėti identifikuoti bakterijų rūšis ir nustatyti kai kurių mikrobų sugebėjimą suskaidyti vandenilio peroksidą, gaminant katalazės fermentą..

Jei stebimi deguonies burbuliukai, tai reiškia, kad bakterija turi katalazės fermentą, nes katalizuoja vandenilio peroksido skilimą į deguonį ir vandenį. Tada sakoma, kad organizmas yra katalazės teigiamas (pavyzdžiui: Staphylococcus aureus).

Oksidazės testas

Šis bandymas naudojamas identifikuoti mikroorganizmus, kuriuose yra citochromo oksidazės fermento (svarbu elektronų transportavimo grandinėje). Dažniausiai jis skiriamas tarp Enterobacteriaceae ir Pseudomadaceae šeimų.

Citochromo oksidazė perneša elektronus iš elektronų transportavimo grandinės į deguonį (galutinis elektronų priėmėjas) ir sumažina jį iki vandens. Oksidazės bandymai suteikia dirbtinių elektronų donorų ir akceptorių molekulių.

Kai elektronų donorą oksiduoja citochromo oksidazė, terpė tampa tamsiai violetine ir laikoma teigiamu rezultatu. Mikroorganizmas Pseudomonas aeruginosa yra teigiamos oksidazės bakterijos pavyzdys.

Sūdytas manitolio agaro testas (MSA)

Šis bandymas yra selektyvus ir diferencinis. MSA parinks organizmus, galinčius gyventi aplinkoje, kur yra didelė druskos koncentracija, pvz. \ T Staphylococcus priešingai nei. \ t Streptococcus, esant tokioms sąlygoms.

Šio bandymo diferencialinis komponentas yra cukraus manitolis. Organai, galintys naudoti manitolį kaip maisto šaltinį, gamins fermentacijos šalutinius produktus, kurie yra rūgštūs ir todėl sumažins terpės pH..

Medžiagos rūgštingumas sukelia pH indikatorių, fenolio raudoną, geltoną. Tokiu būdu diferencijuojamų bakterijų rūšių pavyzdžiai yra šie: Staphylococcus aureus (teigiamas, nes jis fermentuoja manitolį) ir Staphylococcus epidermidis (neigiamas, nes manitolis fermentuoja).

Koagulazės tyrimas

Koagulazė yra fermentas, kuris padeda koaguliuoti kraujo plazmą. Šis tyrimas atliekamas nustatant teigiamas gramteigiamas ir katalazei teigiamas bakterijas Staphylococcus aureus (teigiama koagulazė) Tiesą sakant, koagulazė yra šios bakterijos rūšies virulentinis faktorius.

Dėl šio bakterijos sukeltos infekcijos susidaro krešulių susidarymas tikriausiai apsaugo jį nuo fagocitozės. Šis testas yra labai naudingas, kai norite atskirti Staphylococcus aureus kitų rūšių žuvų. \ t Staphylococcus kurios yra neigiamos koagulazės.

Ureazės tyrimas

Šis bandymas naudojamas identifikuoti bakterijas, galinčias hidrolizuoti karbamidą, naudojant fermentą ureazę. Jis dažniausiai naudojamas atskirti lytį Proteus kitų enterinių bakterijų.

Karbamido hidrolizė gamina amoniaką kaip vieną iš jo produktų. Ši silpna bazė padidina terpės pH, didesnį kaip 8,4, o pH indikatorius (fenolio raudonas) keičiasi nuo geltonos iki rožinės spalvos. Teigiamas ureazės bakterijos pavyzdys yra Proteus mirabilis.

Kokie yra biocheminiai tyrimai??

Biocheminiai mikrobiologiniai tyrimai naudojami mikrobų sukeltų ligų diagnozavimui ir gydymui, skiriamam kovojant su jais. Be to, jie naudojami infekcinių ligų atrankai ir jų prognozei..

Biocheminis mikroorganizmų identifikavimas suteikia idėją apie tai, ką šie mikroorganizmai gali daryti, nes gali būti diskriminuojami skirtingų tos pačios rūšies padermių specifiniai biocheminiai profiliai.

Specifinės fermentinės veiklos skirtumai informuoja apie mikroorganizmo ekologiją, fiziologiją ar natūralią buveinę, kuri kai kuriais atvejais gali būti laikoma svarbia informacija.

Reikšmė

Struktūriniai skirtumai, susiję su bakterijų forma, dydžiu ir išdėstymu, labai mažai padeda identifikavimo procese, nes yra daug bakterijų rūšių, turinčių panašią formą, dydį ir išdėstymą.

Dėl šios priežasties galiausiai bakterijų identifikavimas visų pirma grindžiamas jų biocheminės veiklos skirtumais.

Kiekviena bakterijų rūšis turi aiškiai apibrėžtą medžiagų apykaitos veiklą, kuri skiriasi nuo visų kitų rūšių. Šie biocheminiai „pirštų atspaudai“ yra savybės, kontroliuojamos bakterijų fermentų.

Taigi, biocheminiai tyrimai yra svarbūs, nes jie padeda tyrėjui teisingai identifikuoti mėginyje esančius patogenus ir tokiu būdu sugebėti rekomenduoti pacientui tinkamą gydymą..

Nuorodos

1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Klinikinė biochemija (8-asis red.). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, P. H., ir Cowan, S. T. (1952). Biocheminiai bakteriologiniai metodai. Bendrosios mikrobiologijos žurnalas, 6(1952), 187-197.
3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Klinikinė biochemija (5-asis red.). Elsevier sveikatos mokslai.
4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Praktinis mikrobiologijos vadovas (2 red.). „CRC Press“.
5. Harriganas, W. (1998). Laboratoriniai maisto mikrobiologijos metodai (3-asis red.). „Academic Press“.
6. Vasanthakumari, R. (2009). Praktinė mikrobiologija. BI leidiniai Pvt Ltd.