Agaro Salmonella-Shigella pamatai, paruošimas ir naudojimas



The Salmonella-Shigella agaras taip pat žinomas kaip SS agaras, yra vidutiniškai selektyvi ir diferencinė terpė, specialiai sukurta Salmonella ir Shigella genties enteropatogeninių bakterijų išskyrimui iš aplinkos ir klinikinių mėginių..

SS agaras turi sudėtingą sudėtį; Jį sudaro mėsos ekstraktas, peptonas, laktozė, tulžies druskos, natrio citratas, natrio tiosulfatas, geležies citratas, agaras, neutrali raudona, ryškiai žalia ir distiliuotas vanduo. Atsižvelgiant į didelį selektyvumą, galima pasodinti mėginius su gausia mišriąja augmenija.

Mikrobiologijos laboratorijose Salmonella-Shigella terpė plačiai naudojama tiriant Salmonella ir Shigella buvimą vidurių išmatų, nuotekų, geriamojo vandens ir maisto mėginiuose..

Kartais būtina panaudoti sodrinimo sultinius (laktozės sultinį) ir sodrinimą (selenito cistino sultinį), kad būtų atkurta Salmonella padermė.

Šie veiksmai yra būtini, jei įtariama, kad Salmonella egzistuoja labai mažas kiekis, arba jei štamas gali būti netinkamai apdorojamas procesais, būdingais pramoninei gamybai, daugiausia perdirbtiems maisto produktams. Taip pat patartina praturtinti išmatose iš pacientų, gydytų antibiotikais.

Vėliau sodrintą sultinį galima sėti į Salmonella-Shigella agarą ir kitas panašias terpes, tokias kaip ksilozės agaras, deoksisiloksano lizinas (XLD) ir enterinis Hektoen agaras (HE)..

Indeksas

  • 1 Fondas
    • 1.1. Maistinė galia
    • 1.2 Suderinamumas
    • 1.3. Atrankinis
    • 1.4 Diferencialas
  • 2 Paruošimas
  • 3 Naudokite
  • 4 Apribojimai
  • 5 Kokybės kontrolė
  • 6 Nuorodos

Fondas

Kiekviena Salmonella-Shigella auginimo terpės sudedamoji dalis turi specifinę funkciją, o visas mišinys suteikia jai būdingas savybes..

Maistinga galia

Mėsos ekstraktas ir peptonas (suardytas kazeinas ir gyvūnų audiniai) suteikia reikiamų maistinių medžiagų (nitrogenų, anglies ir vitaminų) mikroorganizmų, galinčių toleruoti likusius komponentus, kūrimui..

Nuoseklumas

Agaro agaras yra atsakingas už kietos konsistencijos užtikrinimą terpėje.

Selektyvus

Ši terpė yra labai selektyvi, nes jame yra tulžies druskų, natrio citrato ir ryškiai žalios spalvos. Todėl jis slopina visų gramteigiamų bakterijų ir daugelio gramnegatyvių bakterijų, įskaitant kai kuriuos koliformus, augimą.

Nors Salmonella genties bakterijos ir kai kurie Shigella padermės palaiko šiuos junginius.

Daugiausia Salmonella gentis yra labai atspari tulžies druskoms, todėl jie gali gyventi kai kurių pacientų, kurie nuolat išstumia bakterijas išmatose, tulžies pūslėje.

Diferencialas

Laktozė yra fermentuojantis angliavandenis, padedantis diferencijuoti laktozės fermentavimo padermes nuo nefermentuojančių padermių. Šią savybę patvirtina pH rodiklio buvimas, kuris šioje terpėje yra fenolio raudonas.

Laktozės fermentacijos padermės duoda raudonąsias kolonijas, o nefermentuojančios padermės yra bespalvės. Ši savybė yra svarbi, nes Salmonella ir Shigella fermentuoja laktozę.

Kita vertus, ši terpė yra natrio tiosulfatas, kaip geležies šaltinis ir geležies citratas. Abu junginiai gali diferencijuoti bakterijas, galinčias gaminti vandenilio sulfidą. Jie reaguoja, kad susidarytų juodos netirpios ir matomos geležies sulfido nuosėdos.

Ši savybė turi keletą Salmonella genties padermių. Paprastai jų kolonijos yra bespalvės, juodos spalvos taškas. Likusios salmoneliozės nerodo H2S ir atsiranda kaip bespalvės kolonijos.

Kita vertus, Shigella genties kolonijos yra bespalvės, be juodinimo.

Paruošimas

Tai yra labai paprasta paruošti.

Pasverkite 63 g dehidratuotos komercinės terpės ir ištirpinkite vienu litru distiliuoto vandens. Šildykite tirpalą ir maišykite. Mišinys gali virti iki minutės.

Ši terpė neturėtų autoklavo. Po jo ištirpinimo jis patiekiamas tiesiai ant vienos arba dviejų sterilių plokštelių.

Sustiprinus, jie yra apversti atvirkščiai plokštelių formuotojams ir laikomi šaldytuve (2–8 ° C), kol jie bus naudojami.

Paruošta terpė turėtų būti pH 7,2 ± 0,2 ir oranžinė raudona.

Svarbu, kad prieš sėjant mėginius būtų galima grūdinti plokštes. Jūs galite tiesiogiai sėti pradinį mėginį, iškrauti medžiagą ant agaro dalies, o tada iš jo ištiesti.

Naudojant praturtintus sultinius, perkelkite dalį selenito sultinio ir sėjama su drigalskio mentele..

Inkubuokite 37 ° C temperatūroje 24 valandas aerobioze.

Turėkite omenyje, kad svorio ir galutinio terpės pH kiekis gali skirtis priklausomai nuo komercinio namo. Pagrindo plokštė visada duoda jo paruošimo indikacijas.

Naudokite

Jis dažnai naudojamas analizuojant išmatų kultūras ir mikrobiologinius tyrimus dėl liekamojo vandens mėginių, geriamojo vandens ir maisto.

Dažnai paruošiamos dvigubos plokštelės, vienoje pusėje yra Salmonella-Shigella agaras, o kitoje pusėje - XLD agaras..

Apribojimai

-Kai kurios Shigella padermės nesaugo šioje terpėje. Todėl tai nėra rekomenduojama pirminiai šios genties izoliacijai.

-Ne kiekviena aiški kolonija su juodu centru rodo Salmonella; Biocheminiai tyrimai turi būti atliekami siekiant teisingai identifikuoti, nes kai kurių Proteus padermių kolonijos neatitinka salmonelių kolonijų..

-Dehidratuota terpė turi būti atsargi aplinkai, nes ji yra labai higroskopinė. Todėl jis turi būti laikomas sausoje ir gerai uždaroje aplinkoje. Atidarytas labai trumpam laikotarpiui.

-Laikui bėgant tulžies druskos terpėje gali nusodinti, suformuojant vaizdą, panašų į matuotą agare, tačiau tai neturi įtakos rezultatams.

-Kai kurios Shigella padermės gali lėtai fermentuoti laktozę.

Kokybės kontrolė

Norint įrodyti, kad terpė veikia teisingai, patartina sodinti žinomus arba sertifikuotus kontrolinius kamienus ir stebėti, ar augimas atitinka numatytas charakteristikas.

Šiuo tikslu. \ T E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium o Enterococcus faecalis.

Laukiami rezultatai:

Escherichia coli --rausvos išgaubtos kolonijos.

Enterobacter ir Klebsiella- didelių kolonijų ir raudonos arba rožinės gleivinės.

Shigella flexneri --skaidrios arba bespalvės plokščios kolonijos.

Salmonella typhimurium - bespalvės kolonijos su juodu centru.

Enterococcus faecalis-- bendras slopinimas.

Nuorodos

  1. Difco Francisco Soria Melguizo laboratorijos. Salmonella-Shigella agaras. 2009. Galima rasti adresu: f-soria.es
  2. BD laboratorija. BD Salmonella-Shigella agaras. 2013 m
  3. Laboratorijos Britanija. Salmonella-Shigella agaras. 2015 m. Galima rasti adresu: britanialab.com
  4. Valtek diagnostika. Salmonella-shigella agaras (SS agaras) .2010. Yra: andinamedica.com
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiologinė Bailey & Scott diagnozė. 12 red. Redakcija Panamericana S.A. Argentina.
  6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinė diagnostika. 5th ed. Redakcija Panamericana S.A. Argentina.