Agaro druskos ir manitolio pamatai, paruošimas ir naudojimas

The druskos agaras ir manitolis arba sūrus manitolis yra kieta, selektyvi ir diferencinė kultūros terpė. Jis buvo sukurtas Chapmano patogeninių gramteigiamų kokių izoliacijai, ypač Staphylococcus aureus.

Tačiau taip pat naudinga išskirti Staphylococcus epidermidis, kuris kartais gali būti kaip oportunistinis patogenas, ir. \ t Staphylococcus saprophyticus, tarp kitų rūšių.

Kai kurios „Enterococcus“ gali augti šioje terpėje, taip pat tam tikrose gramteigiamose sporų formuojančiose bacilose.

Ši terpė yra labai naudinga klinikinių mėginių analizę, tačiau taip pat naudojamas maisto mikrobiologinės analizės ir kokybės kontrolės pramoninių produktų, tokių kaip kosmetika, vaistus ir kt.

Sūdytas manitolio agaras susideda iš jautienos, tripteino, manitolio, natrio chlorido, fenolio raudono ir agaro ekstraktų ir peptonų..

Indeksas

• 1 Fondas
• 2 Paruošimas
• 3 Naudojimas
• 4 Kokybės kontrolė
• 5 Galutinės pastabos
• 6 Nuorodos

Fondas

Manitolio agaras yra selektyvus dėl didelės druskos koncentracijos. Druskingumas veikia kaip slopinanti medžiaga ir užkerta kelią gramnegatyvių bakterijų augimui.

Tai taip pat skiriasi dėl manitolio angliavandenių ir fenolio raudono pH indikatoriaus. Iš to bakterijos, galinčios fermentuoti manitolį, gamina rūgštis, rūgština terpę, sukasi kolonijas ir vidutiniškai geltoną.

Kita vertus, kolonijos, kurios nemodifikuoja manitolio, auga terpėje, kurioje yra mėsos ir tripteinos ekstraktų ir peptonų teikiamų maistinių medžiagų. Iš ten bakterijos išskiria anglies, azoto, vitaminų ir mineralų, reikalingų jų augimui.

Tokiu atveju kolonijos gali būti silpnos arba stiprios rožinės spalvos, o terpė išlieka tokia pat spalva ar fuksija.

Agaras yra medžiaga, užtikrinanti nuoseklumą terpėje.

Paruošimas

Paruošti vieną litrą manitolis druskos agaro 111 g dehidratuotų terpėje kad vienas iš komercinių pageidautina jie yra, pasvertų ir ištirpinto 1000 ml distiliuoto vandens, naudojant Fiola.

Šiluma naudojama dažnai pašalinant terpę, kad pagerėtų tirpinimo procesas. Leiskite jam virti minutę.

Fiola laikoma autoklave 121 ° C temperatūroje 15 minučių.

Per tam tikrą laiką, buteliuką, pašalintas iš autoklavo, leidžiama nusistovėti ir yra patiekiami nuo 15 iki 20 ml sterilaus Petri lėkštelių, kai temperatūra yra apie 50-55 ° C.

Leidžiama sukietėti, užsakyti atvirkštine forma plaqueros ir laikyti šaldytuve iki jo naudojimo. Prieš pasodinant mėginį, turite palaukti, kol plokštelė užims aplinkos temperatūrą.

Plokštelės sėjamos stygavimu arba sėjant ant paviršiaus drigalskio mentele. Galutinis paruoštos terpės pH turi būti 7,4 ± 0,2

Dehidratuotos terpės spalva yra šviesiai smėlio spalvos ir paruoštos terpės spalva yra oranžinė.

Naudojimas

Dėl didelės selektyvumo ši terpė idealiai tinka sodinti mėginius su mišriąja flora, kurioje norima ieškoti Staphylococcus aureus, kaip pagrindinė šios genties patogenas.

Šia prasme, viena iš labiausiai paplitusių reikmėms yra mikrobiologinei analizei mėginių gerklės tamponai ir nosies, ypač siekiant nustatyti besimptomis vežėjai S. aureus.

Kai kurios šalys įgyvendino šią analizę kaip privalomą reikalavimą žmonėms, kurie nori dirbti kaip maisto tiekėjai.

Ši kontrolė neleidžia samdyti žmones, kurie yra vežėjai S. aureus, taip išvengiant masiško apsinuodijimo maistu, vartojant maisto produktus, užterštus stafilokokiniu enterotoksinu.

Jis taip pat gali būti įtrauktas į žaizdų infekcijų, kraujo kultūrų, CSF, bronchoalveolinio plovimo sėklą..

Sūdytas manitolio agaras yra naudingas pakartotinai išskiriant šlapimo kultūrų kolonijas iš CLED agaro arba kraujo agaro, kurio gramų skaičius parodė gramteigiamus kokius klasteriuose.

Jis taip pat galioja ir mikrobiologinei maisto, geriamojo vandens, dirvožemio analizei, be kita ko.

Kokybės kontrolė

Paruošus plokštelių partiją su sūdytu manitolio agaru, patartina atlikti kokybės kontrolę. Kontrolinės padermės sėjamos, norint parodyti, ar yra augimas.

Kaip teigiama kontrolė, žinomi Staphylococcus aureus. Jis turi augti patenkinamai, vystydamas geltonas kolonijas, o terpė taip pat tampa tos pačios spalvos.

Taip pat patogu įtraukti žinomą štamą Staphylococcus epidermidis. Jis turi augti patenkinamai, vystydamas rožines kolonijas, o terpė išlieka tokia pat spalva arba tamsėja stipresnėje rožinėje.

Kaip neigiama kontrolė, naudojami štamai, kurie neturėtų augti šioje terpėje. Pavyzdžiui, galite sodinti žinomą štamą Escherichia coli arba Klebsiella pneumoniae. Numatomas rezultatas yra visiškas slopinimas, ty ne augimas.

Be to, turėtų būti inkubuojama plokštelė be inokuliacijos. Joje neturėtų būti augimo, spalvos pokyčių.

Svarbu, kad plokštelė nebūtų naudojama, jei yra požymių, kad, pvz., Yra užteršimas, dehidratacija, spalvos pasikeitimas..

Galutinės pastabos

Naudojant sūdytą manitolio agaro terpę, reikia atsižvelgti į kai kuriuos svarbius aspektus:

-Geltonų kolonijų augimas nerodo, kad tai yra Staphylococcus aureus. Reikia nepamiršti, kad kai kurios Enterococcus padermės gali augti šioje terpėje ir fermentuoti manitolį, taip pat tam tikrus gramteigiamus sporas formuojančius bacilius..

Todėl svarbu atlikti koloniją ir katalazės testą.

-Kita vertus, reikia manyti, kad kitos Staphylococcus rūšys skiriasi nuo aureus Jie taip pat gali fermentuoti manitolį. Todėl svarbu, kad kolonija būtų subkultūruota į maistinių medžiagų sultinį, iš kurio būtų imamas iš jų, ir atlikti koagulazės testą.

Tarp Staphylococcus rūšių, turinčių klinikinę reikšmę žmogaus fermentavimui, yra: S. aureus, S. simulans, S., capitis, capitis var, S., capitis urealyticus var, S. xylosus, S. cohnii var urealyticum, be kita ko.

Kiti gali suteikti kintamą reakciją, ty kartais teigiamą ir kartais neigiamą. Kai kurie yra S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, be kita ko.

-Kolagulų bandymui atlikti kolonijų nerekomenduojama vartoti tiesiogiai iš manitolio agaro, nes didelė terpės druskos koncentracija gali trukdyti rezultatui.

-Galiausiai rekomenduojama inkubuoti sūdytomis manitolėmis sėjamąsias plokšteles ne ilgiau kaip 48 valandas, nes tam tikros padermės S. aureus Jie gali fermentuoti lėtai manitolį, nors tai nėra labai dažna.

Nuorodos

1. Laboratorijos Britanija. Manitolio sūrus agaras. 2015 m. Galima rasti adresu: britanialab.com
2. "Sūdyta manitolio agaras". Vikipedija, laisva enciklopedija. 2018 m. Spalio 31 d., 19:08 UTC. Sausio 17, 2019, 20:55, galima rasti adresu: en.wikipedia.org.
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinė diagnostika. (5-asis red.). Argentina, Redakcijos Panamericana S.A..
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiologinė Bailey & Scott diagnozė. 12 red. Argentina Panamericana S.A Redaktorius
5. BD laboratorijos BD Mannitol Salt Agar. 2013 m.