„MacConkey Agar“ pamatas, paruošimas ir naudojimas



The „MacConkey“ agaras Tai kieta kultivavimo terpė, leidžianti išskirtinai išskirti Gram neigiamus bacilius. Dėl šios priežasties ji yra selektyvi terpė ir taip pat leidžia atskirti fermentacijos ir nerauginimo laktozės bakterijas, todėl ji yra diferencinė terpė. Tai viena iš plačiausiai naudojamų mikroorganizmų kultūros terpių.

Ši terpė daugiausia naudojama šeimos negatyvių bacilių izoliavimui Enterobakterijos, įskaitant oportunistines ir enteropatogenines rūšis.

Jis taip pat gali būti naudojamas kitų skrandžio ir žarnyno trakte gyvenančių žarnų bakterijų izoliavimui, bet nepriklauso Enterobakterijos, kaip Aeromonas sp, Plesiomonas sp, be kita ko.

Galiausiai, ji gali izoliuoti kitus gramnegatyvius, nekommentuojančius gliukozės bacilus, kurie randami aplinkoje, vandenyje ar dirvožemyje, bet kartais gali būti oportunistiniai patogenai, tokie kaip Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alkaline sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, be kita ko.

Indeksas

  • 1 Fondas
    • 1.1 „MacConkey“ agaras
  • 2 Paruošimas
  • 3 Tradicinio „MacConkey“ agaro naudojimas
  • 4 Kiti „MacConkey“ agaro variantai
    • 4.1 „MacConkey“ agaras su sorbitu
    • 4.2 „MacConkey“ agaras be kristalo violetinės arba druskos
    • 4.3 „MacConkey“ agaras su cefoperazonu
    • 4.4. MacConkey agaras, paruoštas 10% jūros vandens v / v
  • 5 Nuorodos

Fondas

„MacConkey“ agaras

Šios terpės pagrindą galima paaiškinti jo komponentų aprašymu, nes kiekvienas turi tikslą, kuris lemia jo turtą.

Tulžies druskos ir violetinis kristalas

Šia prasme „MacConkey“ agaras turi sudėtingą sudėtį. Visų pirma jame yra tulžies druskų ir violetinio kristalo.

Šie elementai yra atsakingi už gramteigiamų bakterijų ir kai kurių sunkių gramnegatyvių bacilų augimą. Savo ruožtu ji skatina gramnegatyvių bacilų, kurių šios medžiagos neturi, plėtrą. Štai kodėl ji yra atrankinė terpė.

Manoma, kad ji yra šiek tiek selektyvi, palyginti su kitomis terpėmis, kurios taip pat slopina gramteigiamų bakterijų ir daugelio gramnegatyvių bakterijų augimą.

Jis yra labai selektyvus konkrečiai genčiai, pvz., TCBS agarui Vibrio cholerae ir kitos panašios halofilinės ir alkalofilinės rūšys.

Peptonai, polipononai ir laktozė

Sudėtyje yra medžiagų, kurios suteikia būtinas maistines medžiagas mikroorganizmams, kurie išsivysto šioje terpėje, pvz., Peptonai, polipononai ir laktozė.

Laktozė yra pagrindinis taškas, kad terpė būtų diferencinė terpė, nes mikroorganizmai, galintys fermentuoti laktozę, sukurs stiprią rausvą koloniją.

Kai kurios bakterijos lėtai arba silpnai gali fermentuoti laktozę, vystydamos šviesiai rožines kolonijas ir išlieka teigiamos laktozės.

Tie, kurie nesmulkina laktozės, naudoja peptonus kaip energijos šaltinį, gaminantį amoniaką, šarminant terpę. Todėl kolonijos yra bespalvės arba skaidrios.

PH indikatorius

Spalvos pasikeitimas pasiekiamas per kitą esminį junginį, turintį „MacConkey“ agarą. Šis junginys yra pH rodiklis, kuris šiuo atveju yra neutralus raudonas.

Laktozės fermentacija sukuria mišrių rūgščių gamybą. Jie rūgština terpę, esant pH žemiau 6,8..

Dėl to pH rodiklis pasisuka į intensyvų rožinį atspalvį. Spalvos intensyvumas gali skirtis priklausomai nuo galutinio pH.

Distiliuotas vanduo, natrio chloridas ir agaras

Kita vertus, jame yra distiliuoto vandens ir natrio chlorido, kuris suteikia hidrataciją ir osmotinę pusiausvyrą prie terpės. Galiausiai terpėje yra agaro, kuris yra pagrindas, užtikrinantis kietos terpės konsistenciją.

Paruošta MacConkey agaro terpė turi būti galutinai sureguliuota iki 7,1 ± 0,2..

Paruošimas

Vienam litrui „MacConkey“ agaro reikia pasverti 50 g dehidratuotos terpės, po to sudėti į fiolą ir ištirpinti viename litre distiliuoto vandens. Po 10 min. Poilsio jis šildomas nuolat maišant, kol virs 1 minutę.

Tuomet fiola dedama į autoklave ir sterilizuojama 121 ° C temperatūroje 20 minučių. Pasibaigus laikui, jis pašalinamas iš autoklavo ir leidžiama atvėsti iki 45 ° C temperatūros, tada patiekiamas steriliuose Petri lėkštelėse laminarinio srauto gaubte arba prieš Bunseno degiklį..

Leiskite kietėti ir laikyti plokštelės laikiklyje apverstą ir šaldytuve 2–8 ° C temperatūroje iki naudojimo.

Norint gauti „MacConkey“ agarą, kuris slopina „Proteus“ genties sukeltą plitimo efektą, naudojamas mažai druskos „MacConkey“ agaras..

Tradicinio „MacConkey“ agaro naudojimas

„MacConkey“ agaras yra įtrauktas į visus auginimo terpių rinkinius, paruoštus laboratorijoje gautų klinikinių mėginių sėjimui. Jis taip pat naudingas maisto mikrobiologijos ir aplinkos mikrobiologijos srityse.

Gramo neigiamų bakterijų, kurie auga šioje terpėje, įvairovė išreiškia fenotipines charakteristikas, kurios padeda numatyti atitinkamų rūšių diagnozę. Pavyzdžiui, kolonijų dydis, spalva, nuoseklumas ir kvapas yra keletas būdingų savybių.

Šioje aplinkoje rūšys Escherichia coli, Klebsiella sp ir Enterobacter sp gamina stiprios rausvos kolonijos, apsuptos nusodinto tulžies ploto.

Tiek bakterijų, tiek Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp ir Hafnia sp jie gali pasirodyti be spalvos po 24 valandų arba šviesiai rožinės 24–48 valandomis.

Be to, „Proteus“, „Edwadsiella“, „Salmonella“ ir „Shigella“ gentys gamina bespalvius arba skaidrius kolonijas..

Kiti „MacConkey“ agaro variantai

Yra ir kitų MacConkey agaro variantų, turinčių specifinių tikslų. Toliau jie paminėti:

„MacConkey“ agaras su sorbitu

Ši terpė buvo skirta atskirti enteropatogeninį kamieną (Escherichia coli enterohemoraginis O157: H7) iš kitų. \ t Escherichia coli.

Ši terpė keičia angliavandenių laktozę sorbitoliui. . \ T E. coli enterohemoraginė O157: H7 skiriasi nuo likusių, nes nesukelia sorbitolio, todėl gaunamos skaidrios kolonijos, tačiau kitos veislės E. coli jei jie fermentuoja sorbitolį ir kolonijos yra rausvos.

„MacConkey Agar“ be kristalo violetinės arba druskos

Šis agaras labai skiriasi nuo klasikinio „MacConkey“ agaro, nes jame nėra kristalinės violetinės, Gram-teigiamos bakterijos gali augti.

Kita vertus, druskos nebuvimas slopina kai kurių enterinių bakterijų, pvz. Proteus, ir taip palengvinti visų esančių bakterijų, įskaitant gramteigiamas bakterijas, izoliaciją.

„MacConkey“ agaras su cefoperazonu

Šis „MacConkey“ agaro variantas buvo sukurtas iš pradžių izoliuoti Laribacter hongkongensis vėliau jie suprato, kad tai naudinga izoliuoti Arcobacter butzleri. AAbi yra šiek tiek išlenktos negatyvios gramatikos, atsparios cefoperazonui.

Šios bakterijos neseniai buvo susietos su gastroenterito ir viduriavimo priežastimis, įgytomis Azijos ir Europos asmenims, atsirandančiais kaip du stiprūs patogenai..

Antibiotikas leidžia slopinti lydinčią virškinamojo trakto florą, kuri skatina šių bakterijų vystymąsi ir neleidžia jiems nepastebėti, nes jiems reikia 72 valandų..

„MacConkey Agar“, paruoštas 10% jūros vandens v / v

Šis variantas yra naudingas vertinant išmatų užteršimo bakterijų sveikatos rodiklius, įskaitant bendras koliformines ir išmatuotas koliformines formas, esančias rekreaciniame druskos vandenyje (paplūdimiai ir įlankos)..

Cortez ir kt. 2013 parodė, kad tokiu būdu paruošta terpė žymiai padidina šių mikroorganizmų atgavimą druskos aplinkoje, palyginti su MacConkey agaru, paruoštu distiliuoto vandens..

Taip yra todėl, kad modifikuota terpė stimuliuoja bakterijų, kurios yra fiziologiškai ramios, „gyvybingos, bet ne kultivuojamos“, augimą, todėl jos nėra regeneruojamos įprastoje terpėje.

Nuorodos

  1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et al. Cefoperazono MacConkey agaro naudojimas selektyviam izoliavimui Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003 m. 41 (10): 4839-41.
  2. „MacConkey Agar“. Vikipedija, laisva enciklopedija. 2018 m. Balandžio 4 d., 18:16 UTC. 2018 m. Gruodžio 29 d., 15:22 en.wikipedia.org
  3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Mikrobiologinė Bailey & Scott diagnozė. 12 red. Argentina Panamericana S.A Redaktorius.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinė diagnostika. (5-asis red.). Argentina, Redakcijos Panamericana S.A..
  5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Su jūros vandeniu paruoštų auginimo terpių poveikis sveikatos rodikliams Chichiriviche kurortų, Falcón valstijos, Venesuelos jūrų vandenyse. Rev Soc Come Microbiol 2013 m .; 33: 122-128
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktinė klinikinė mikrobiologija. Kadiso universitetas, 2-asis leidimas. UCA leidinių tarnyba.