Cetrimida agaro pamatas, paruošimas, naudojimas



The cetrimido agaras arba cetrimidas yra selektyvi kieta kultūros terpė, skirta izoliuoti Pseudomonas aeruginosa. Jis grindžiamas šiai rūšiai būdingų pigmentų susidarymo išryškinimu ir buvo sukurtas pagal Kingo, Wardo ir Raney sukurtą „Tech agar“ modifikaciją.

Originalios formulės sudėtyje yra magnio chlorido druskų, kalio sulfato, kasos želatinos virškinimo ir agaro agaro. Formulės modifikacija sudarė cetrimido (cetiltrimetilamonio bromido) ir glicerino pridėjimą..

Cetrimido agaras yra naudingas mikrobiologiniams mėginių tyrimams, kai yra Pseudomonas aeruginosa. Pažymėtina, kad ši bakterija yra labai svarbi, nes nors ji yra įprastos aplinkos mikrobiotos dalis, ji dažnai elgiasi kaip oportunistinis patogenas..

Todėl viena iš labiausiai paplitusių šios gemalo sukeltų problemų yra hospitalinės infekcijos, t. Y. Tos, kurios atsiranda ligoninės aplinkoje, atakuojančios depresiją turinčius pacientus..

Kita vertus, dėl šio mikroorganizmo atsparumo drėgmei labiausiai pažeidžiami taršos tikslai yra: pagalbinė kvėpavimo įranga, vaistai, purkštuvai, vandens šaltiniai, oro kondicionieriai, dezinfekavimo priemonės, muilo tirpalai, injekciniai tirpalai, atviros žaizdos , kateteriai, šlapimo kateteriai.

Šiuo požiūriu cetrimido agaras yra naudingas atliekant mikrobiologinius kontrolinius ir kultūrinius elementus, kurie anksčiau buvo pavadinti.

Indeksas

  • 1 Fondas
    • 1.1 Vertimas žodžiu
  • 2 Paruošimas
  • 3 Naudojimas
  • 4 Sėjamoji
  • 5 Apribojimai
  • 6 Kokybės kontrolė
  • 7 Nuorodos

Fondas

Cetrimido agaras yra pagrįstas terpės gebėjimu skatinti augimą P. aeruginosa, stimuliuoja jų pigmentų gamybą ir savo ruožtu slopina kitų mikroorganizmų augimą.

Šios savybės yra susijusios su kiekvienos jos sudedamosios dalies funkcija. Esamas želatinos peptonas tarnauja kaip azoto, vitaminų ir mineralų šaltinis. Glicerolis arba glicerinas veikia kaip anglies šaltinis.

Savo ruožtu cetrimidas (cetiltrimetilamonio bromidas) yra medžiaga, kuri slopina kitų bakterijų augimą nei P. aeruginosa, įskaitant kitas tos pačios genties rūšis.

Inhibicija atsiranda dėl to, kad cetramidas veikia kaip katijoninis ploviklis, destabilizuojantis daugumos bakterijų plazmos membraną, išskyrus P. aeruginosa ir kai kurie kiti, kurie sugeba išgyventi.

Kita vertus, jame yra magnio chlorido ir kalio sulfato. Šie junginiai stimuliuoja fenotipinę ekspresiją, susijusią su Pseudomonas aeruginosa gamina įvairius pigmentus, tarp jų: ​​pirocianiną, pioveriną, piorubiną, piomelaniną ir fluoresceiną. Galiausiai jame yra agaro agaro, kuris suteikia jai tvirtą konsistenciją.

Aiškinimas

Šiame agare gauto augimo interpretacija atliekama taip:

Apvalių, lygių kolonijų su reguliariais kraštais stebėjimas, gaunantis mėlynai žalios, žalios, rudos ar rausvos spalvos pigmentus, taip pat vaisių kvapo (aminoacetofenono) emisija yra numatomas šios bakterijos buvimas minėtame mėginyje..

Kita vertus, tai rodo P. aeruginosa ryškiai gelsvai žalios spalvos pigmento stebėjimas ant kolonijų, kai plokštelė yra veikiama ultravioletinės šviesos.

Pažymėtina, kad kiekviena stebima spalva atsiranda dėl konkretaus pigmento gamybos. Melsvai žalios spalvos pigmentas atitinka pirocianino, žalios iki pioverino, raudonos iki piorrubino, rudos iki piomelanino ir ryškiai gelsvai žalios fluorescencijos ultravioletinėje šviesoje iki fluoresceino gamybą..

Paruošimas

Pasverkite 43 g dehidratuotos terpės ir ištirpinkite distiliuotame vandenyje. Įpilama 10 ml glicerolio. Paimkite mišinį į šilumos šaltinį. Palaukite keletą minučių, kol visiškai ištirps.

Autoklave 121 ° C temperatūroje 15 minučių. Kai temperatūra yra maždaug 50 ° C, palikite stovėti ir pasistengti steriliuose Petri lėkštelėse.

Leiskite sukietėti, apversti, užsakyti į skardines ir laikyti šaldytuve iki naudojimo. Cetrimido agaro plokštelėms sodinti reikia iš anksto išimti iš šaldytuvo ir palikti kambario temperatūrą..

Galutinis terpės pH turi būti 7,2 ± 0,2.

Dehidratuotos terpės spalva yra smėlio spalvos ir preparatas yra nepermatomas baltas.

Naudojimas

Cetrimido agaras gali būti naudojamas visų rūšių mėginiams, kuriuose yra Pseudomonas aeruginosa. Todėl jis yra naudingas visose mikrobiologijos srityse (aplinkos, pramonės, klinikinių, vandens ir maisto)..

Labai svarbu ištirti ligoninės aplinką ir tokiu būdu sugebėti taikyti korekcinius tarpininkus, nes šis mikroorganizmas pasiekia pacientus per paciento naudojamą įrangą, vaistus, tirpalus ir užterštus išteklius..

Tokiu būdu mikroorganizmas gali užkrėsti imunosupresuotų pacientų apatinius kvėpavimo takus, šlapimo takus ir žaizdas..

Taip pat galima atlikti kolonijų skaičių P. aeruginosa mikrobų ribinių testų metu.

Pasėtas

Cetrimido agarą galima naudoti kaip pirminę kultūrą. Plokštelė yra inokuliuojama viename iš jo kraštų ir iš ten ji yra išsibarstyta iki likusios plokštės dalies. Skysti mėginiai gali būti sėti ant paviršiaus drigalskio mentele.

Plokštelės inkubuojamos aerobioze 37 ° C temperatūroje 24 valandas inkubuojant.

Apribojimai

-Nedidelė dalis. \ T  Pseudomonas aeruginosa nesukurkite pirocianino, todėl galite interpretuoti klaidingą neigiamą.

-Kai kurios klinikinės reikšmės Pseudomonas rūšys yra slopinamos šioje terpėje.

-Nepaisant aprašytų charakteristikų Pseudomonas aeruginosa, jie turi būti patvirtinti papildomais identifikavimo bandymais. Bandymas, kurio neturėtų būti, yra oksidazės testas, jis turėtų būti teigiamas.

-Kai kurios enterobakterijos gali augti šioje terpėje ir sukurti geltoną pigmentą, tačiau ji skiriasi nuo Pseudomonas aeruginosa kurioje, veikiant plokštelę ultravioletinei šviesai, nėra fluorescencijos.

-Serratia marcescens sugeba sukurti ir gamina rausvą pigmentą.

-Jei plokštelės, sėjamos cetrimido agaru, tam tikrą laiką yra veikiamos kambario temperatūroje,. \ T P. aeruginosa jie gali prarasti ultravioletinėje šviesoje pastebėtą fluorescenciją, tačiau savybė atkuriama, jei ji pakartotinai inkubuojama 37 ° C temperatūroje..

Kokybės kontrolė

Siekiant patikrinti, ar cetrimido agaras tinkamai veikia, gali būti naudojami kontroliniai kamienai, tokie kaip: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 ir Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Laukiami rezultatai:

  • Į P. aeruginosa geras augimas, su mėlyna-žalsva pigmentu ir teigiama fluoresceinu.
  • S. maltophilia ir S. aureus bus visiškai arba visiškai slopinamas.
  • Tikimasi, kad Escherichia coli būti visiškai sustabdytas.

Nuorodos

  1. Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callís A, Esnard S. Fenotipinis ir serologinis klinikinių izoliatų apibūdinimas iš Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004 m. 13 (3): 1-9.
  2. Laboratorijos Conda Pronadisa. Cetrimido agaro bazė. 2014. Galima rasti adresu: condalab.com
  3. Laboratorijos Britanija. Cetrimida agaras. 2015 m. Galima rasti adresu: britanialab.com
  4. BD laboratorijos BD Pseudosel agaras (Cetrimido agaras). 2013 m
  5. Francisco Soria Melguizo laboratorija, C.A. Cetrimido agaras. 2009 m.: Http://f-soria.es