Nefelometrija, kurią ji sudaro ir naudoja



The nefelometrija susideda iš dalelių (tirpalo arba suspensijos) sukeltos spinduliuotės matavimo, tokiu būdu matuojant išsibarsčiusios spinduliuotės galią kitame kampe nei įsijungiančios spinduliuotės kryptį.

Kai suspensijos dalelė pasiekiama šviesos spinduliu, yra dalis šviesos, kuri atsispindi, kita dalis absorbuojama, kita dalis nukreipiama ir likusi dalis perduodama. Štai kodėl, kai šviesa patenka į skaidrią terpę, kurioje yra kietų dalelių suspensija, suspensija yra drumsta.

Indeksas

  • 1 Kas yra nefelometrija??
    • 1.1 Spinduliuotės dispersija tirpalo dalelėmis
    • 1.2. Nefelometras
    • 1.3 Nukrypimai
    • 1.4 Metrologinės charakteristikos
  • 2 Programos
    • 2.1 Imuninių kompleksų aptikimas
    • 2.2 Kitos programos
  • 3 Nuorodos

Kas yra nefelometrija??

Spinduliuotės dispersija tirpalo dalelėmis

Tuo metu, kai šviesos spindulys susilieja su medžiagos suspensijos dalelėmis, spindulio plitimo kryptis keičia jo kryptį. Šis efektas priklauso nuo šių aspektų:

1. Dalelių matmenys (dydis ir forma).

2. Suspensijos savybės (koncentracija).

3. Šviesos bangos ilgis ir intensyvumas.

4. Atstumas nuo šviesos.

5. Aptikimo kampas.

6. Terpės lūžio rodiklis.

Nepelometras

Nefelometras yra priemonė, naudojama matuoti daleles, suspenduotas skystame mėginyje arba dujose. Taigi fotocelis, esantis 90 ° kampu šviesos šaltinio atžvilgiu, aptinka suspensijoje esančių dalelių spinduliuotę.

Be to, šviesa, atspindima dalelių link fotocelio, priklauso nuo dalelių tankio. 1 diagramoje pateikiami pagrindiniai komponentai, sudaryti iš nefelometro:

A. Spinduliuotės šaltinis

Nefelometrijoje gyvybiškai svarbu turėti spinduliuotės šaltinį, turintį didelę šviesą. Yra įvairių tipų: nuo ksenono lempų ir gyvsidabrio garų lempų, volframo halogeninių lempų, lazerio spinduliuotės,.

B. Monochromatoriaus sistema

Ši sistema yra tarp spinduliuotės šaltinio ir kiuvetės taip, kad būtų išvengta įvairių bangos ilgių spinduliuotės dažnio, palyginti su norima spinduliuote..

Priešingu atveju, fluorescencinės reakcijos arba šildymo poveikis tirpale sukeltų nukrypimus nuo matavimo.

C. Skaitymo kiuvetė

Tai paprastai prizminis arba cilindrinis konteineris ir gali būti skirtingo dydžio. Šiame yra tirpalo sprendimas.

D. Detektorius

Detektorius yra tam tikru atstumu (paprastai labai arti bako) ir yra atsakingas už spinduliuotės, disperguotos suspensijos dalelių, aptikimą..

E. Skaitymo sistema

Paprastai tai yra elektroninė mašina, kuri gauna, konvertuoja ir apdoroja duomenis, kurie šiuo atveju yra atlikti atlikto tyrimo rezultatai.

Nukrypimai

Kiekvienam matavimui taikoma procentinė klaidų dalis, kurią daugiausia lemia:

Užteršti kibirai: kiuvetėse bet koks tirpalo išorėje esantis agentas, kuris yra vidinėje arba išorinėje kiuvetėje, sumažina spinduliavimo šviesą ant detektoriaus kelio (sugedusios kiuvetės, dulkės, pritvirtintos prie kiuvetės sienelių).

Trikdžiai: kai kurių mikrobinių teršalų ar drumstumo buvimas išsklaido spinduliavimo energiją, didindamas dispersijos intensyvumą.

Fluorescenciniai junginiai: tai yra junginiai, kurie, kai sužadina spinduliuotė, sukelia klaidingus ir didelius dispersijos tankio rodmenis.

Reagentų išsaugojimas: netinkama sistemos temperatūra gali sukelti nepalankias sąlygas tyrimui ir paskatinti drumstų reagentų arba nuosėdų buvimą.

Elektros energijos svyravimai: kad išvengtumėte spinduliavimo šaltinio, rekomenduojama naudoti vienodą spinduliuotę.

Metrologinės charakteristikos

Kadangi aptiktos spinduliuotės spinduliuotės galia yra tiesiogiai proporcinga dalelių masės koncentracijai, nefelometriniai tyrimai teoriškai turi didesnį metrologinį jautrumą nei kiti panašūs metodai (pvz., Turbidimetrija)..

Be to, šis metodas reikalauja atskiestų tirpalų. Tai leidžia sumažinti absorbcijos ir atspindžio reiškinius.

Programos

Nefelometriniai tyrimai atlieka labai svarbią vietą klinikinėse laboratorijose. Taikymo sritys svyruoja nuo imunoglobulinų ir ūminės fazės baltymų, komplemento ir koaguliacijos nustatymo.

Imuninių kompleksų aptikimas

Kai biologinis mėginys turi dominančią antigeną, jis sumaišomas (buferiniame tirpale) su antikūnu, kad susidarytų imuninis kompleksas.

Nefelometrija matuoja šviesos kiekį, išsklaidytą antigeno-antikūno reakcija (Ag-Ac), ir tokiu būdu nustatomi imuniniai kompleksai.

Šis tyrimas gali būti atliktas dviem būdais:

Nefelometrija galutiniame taške:

Šį metodą galima naudoti analizuojant galutinį parametrą, kuriame tiriamo biologinio mėginio antikūnas yra inkubuojamas dvidešimt keturias valandas..

Ag-Ac kompleksas matuojamas naudojant nefiksometrą ir išsklaidytos šviesos kiekis lyginamas su tuo pačiu matavimu, atliktu prieš sudedant kompleksą.

Kinetinė nefelometrija

Šiuo metodu nuolat stebimas kompleksinio susidarymo greitis. Reakcijos greitis priklauso nuo antigeno koncentracijos mėginyje. Čia matavimai atliekami kaip laiko funkcija, todėl pirmasis matavimas atliekamas tuo metu, kai „nulis“ (t = 0).

Kinetinė nefelometrija yra dažniausiai naudojamas metodas, nes tyrimas gali būti atliekamas per 1 valandą, palyginti su ilgo galutinio tyrimo metodo trukme. Dispersijos santykis matuojamas iškart po reagento pridėjimo.

Todėl tol, kol reagentas yra pastovus, esamo antigeno kiekis laikomas tiesiogiai proporcingu pokyčio greičiui.

Kitos programos

Nefelometrija paprastai naudojama vandens cheminės kokybės analizėje, siekiant nustatyti aiškumą ir kontroliuoti jo apdorojimo procesus.

Jis taip pat naudojamas matuoti oro taršą, kurioje dalelių koncentracija nustatoma pagal dispersiją, kurią jie gamina atsitiktinėje šviesoje..

Nuorodos

  1. Britannica, E. (s.f.). Nefelometrija ir turbidimetrija. Susigrąžinta iš britannica.com
  2. Al-Saleh, M. (s.f.). Turbidimetrija ir neelometrija. Gauta iš pdfs.semanticscholar.org
  3. Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Susigrąžinta iš technochemical.com
  4. Morais, I. V. (2006). Turbidimetrinė ir nepelometrinė srauto analizė. Gauta iš repositorio.ucp.p
  5. Sasson, S. (2014). Neelometrijos ir turbidimetrijos principai. Gauta iš notesonimmunology.files.wordpress.com
  6. Stanley, J. (2002). Imunologijos ir serologijos pagrindai. Albany, NY: „Thompson Learning“. Gauta iš books.google.co.ve
  7. Vikipedija. (s.f.). Nefelometrija (medicina). Gauta iš en.wikipedia.org