Chromatograma, kokia ji yra ir kokios rūšys



The chromatograma yra dvimatis grafinis įrašas, gautas absorbuojančioje terpėje, kuri rodo medžiagų atskyrimą chromatografijos būdu. Chromatogramoje susidaro matomas modelis, smailės arba dėmės, atspindinčios fizinį mišinio komponentų atskyrimą.

Apatinis skaičius yra chromatograma, kurioje yra trys smailės, A, B ir C, iš trijų mėginio komponentų, atskirtų chromatografija. Pastebėta, kad kiekvienas iš trijų smailių turi skirtingą aukštį ir vietą chromatogramos laiko ašyje.

Ordinatų ašis arba Y įrašo informaciją apie signalo stiprumą (šiuo atveju milivoltais mV). Atstovauja registrui, priklausomai nuo detektoriaus, tam tikros medžiagos ar atskiro mišinio komponento fizinės savybės.

Piko aukštis yra proporcingas atskirtos mėginio komponento koncentracijai optimalioje sistemoje. Taigi, pavyzdžiui, lengva vizualizuoti, kad B komponentas yra didesnis nei A ir C.

Abcisa arba X ašyje yra pavyzdžio ar mišinio komponentų sulaikymo laikas. Tai laikas, praėjęs nuo mėginio injekcijos iki sustojimo, kiekvienai grynai medžiagai skiriasi.

Indeksas

  • 1 Kas yra chromatograma??
    • 1.1 Medžiagų identifikavimas
    • 1.2 Medžiagų grynumo klasifikacija
    • 1.3 Medžiagų kiekybinis nustatymas
  • 2 tipai
    • 2.1 Chromatogramos ant popieriaus arba plonos plėvelės
    • 2.2 Detektorių sukurtos chromatogramos
  • 3 Nuorodos

Kas yra chromatograma??

Jis sudaro galutinį viso chromatografijos proceso įrašą. Iš jų gaunami analitinio intereso parametrai. Tai galima gauti kaip elektroninę bylą, spausdintą histogramą arba proceso palaikymą; pavyzdžiui, popieriuje.

Y ašis generuojama signalo detektoriais arba atsako intensyvumu, pavyzdžiui, spektrofotometrais. Būtina optimali laiko, galimų smailių ar dėmių charakteristikų analizė; be kitų aspektų, dydis, vieta, spalva.

Chromatogramų analizei paprastai reikia naudoti kontrolines priemones arba standartus, tapatybės nustatomas medžiagas ir žinomą koncentraciją. Šių kontrolės priemonių analizė leidžia palyginti su tiriamo mėginio komponentais būdingais mėginiais.

Chromatogramoje galite stebėti ir analizuoti, kaip buvo atliktas mišinio komponentų atskyrimas. Jo optimalus tyrimas leidžia nustatyti cheminę medžiagą, siekiant parodyti jo grynumą, kiekybiškai įvertinti mišinyje esančių medžiagų kiekį..

Išgauta informacija gali būti kokybinio pobūdžio; pavyzdžiui, kai nustatomos medžiagos ir nustatomas jų grynumas. Kiekybinė informacija yra susijusi su mišinio komponentų skaičiaus ir atskirtos analitės koncentracijos nustatymu.

Medžiagų identifikavimas

Analizuojant chromatogramos rezultatus, galima identifikuoti įvairias medžiagas, lyginant sulaikymo trukmę su žinomų medžiagų sulaikymo trukme. Tai galima pastebėti, jei tiriamos medžiagos važiuoja tuo pačiu atstumu, jei jos turi tą patį laiką kaip ir žinomos medžiagos.

Pavyzdžiui, chromatograma leidžia atpažinti ir identifikuoti šlapime esančius vaistų metabolitus, tokius kaip stimuliatoriai ir steroidai. Tai yra svarbi parama tiriant ir tiriant kai kuriuos naujagimio genetinius sutrikimus gaminamus metabolitus.

Chromatograma palengvina geriamojo vandens halogenintų angliavandenilių aptikimą, be kitų medžiagų. Tai yra būtina laboratorinės kokybės kontrolės analizėje, nes ji leidžia aptikti ir identifikuoti įvairiuose produktuose esančius teršalus..

Medžiagų grynumo klasifikavimas

Chromatogramoje galite atskirti grynas ir nešvarias medžiagas. Gryna medžiaga chromatogramoje gautų vieną smailę; nors nešvari medžiaga sukurtų du ar daugiau smailių.

Tinkamai reguliuojant sąlygas, kuriomis atliekama chromatografija, gali būti užkirstas kelias dviem medžiagoms sudaryti vieną smailę.

Medžiagų kiekybinis nustatymas

Analizuojant chromatogramos smailių plotą, galima apskaičiuoti mėginio komponentų koncentraciją.

Todėl smailės plotas yra proporcingas mėginyje esančios medžiagos kiekiui. Šie kiekybiniai duomenys gaunami labai jautriose sistemose, pavyzdžiui, tose, kurios sukuria dujų arba skysčių chromatografiją.

Tipai

Vienas iš chromatogramų klasifikacijų yra glaudžiai susijęs su skirtingomis chromatografijos rūšimis, kurios sukuria atitinkamą chromatogramą.

Priklausomai nuo detektorių vykdymo sąlygų, be kita ko, chromatograma skiriasi savo turiniu ir kokybe.

Chromatogramos ant popieriaus arba plonos plėvelės

Chromatogramą galima sukurti tiesiai ant popieriaus arba plonos plėvelės, tiesiogiai parodant mėginio komponentų pasiskirstymą ar pasiskirstymą.

Tai labai naudinga atskiriant ir tiriant spalvotas medžiagas, turinčias natūralių pigmentų, tokių kaip chlorofilas. Ji gali būti taikoma vystymosi procesams, jei medžiagos neturi natūralios spalvos ir yra naudingos kokybiniams tyrimams.

Chromatogramos, sukurtos detektoriais

Chromatogramą taip pat galima gauti naudojant detektorių, registruojantį chromatografijos atsaką, išėjimą arba galutinį signalą. Kaip minėta anksčiau, šis detektorius dažniausiai yra spektrofotometras, masių spektrometras, automatiniai sekvenavimo įtaisai, elektrocheminės medžiagos..

Chromatogramos, sukurtos stulpeliuose, tiek dujose, tiek skysčiuose, taip pat didelės skiriamosios gebos plonu sluoksniu, naudoja detektorius.

Priklausomai nuo detektoriaus tipo, chromatograma gali būti klasifikuojama kaip diferencinė arba integrali, priklausomai nuo detektoriaus atsako formos..

Diferencinė chromatograma

Diferencinis detektorius nuolat matuoja chromatogramos atsako signalą, o integruoti detektoriai kumuliaciškai matuoja atitinkamą signalą.

Diferencinė chromatograma yra diferencinio detektoriaus chromatograma. Tarp šių detektorių galima paminėti, pavyzdžiui, spektrofotometrus ir elektrinio laidumo pokyčių detektorius.

Šis chromatogramos tipas parodė anijonų atskyrimo iš mėginio, nustatyto netiesiogine fotometrija, rezultatą. Taip pat buvo gauti tokie patys rezultatai, kaip ištirti jonus, pvz., Su galutiniu detektavimu laidžiu.

Viršutiniame grafike parodyta diferencinės chromatogramos, gautos naudojant automatinius DNR sekos (dezoksiribonukleino rūgštis), pavyzdys. Grafike aiškiai parodyta keturių spalvų smailė, viena spalva kiekvienai DNR azoto bazei.

Remiant kompiuterizuotą programą palengvinamas analizuojamų DNR bazių sekos aiškinimas, taip pat sudėtingesnių analitų..

Išsami chromatograma

Integruota chromatograma atitinka tą, kuri gaunama integruotu detektoriumi. Šioje chromatogramoje įrodomas vieno tiriamo komponento išvestis. Nėra jokių smailių, kaip ir diferencialo.

Integrinėje chromatogramoje gaunamas įrašas, aprašytas kaip žingsnis. Ši forma yra chromatogramos dalis, atitinkanti vienos medžiagos, kuri palieka kolonėlę, kiekį.

Nuorodos

  1. Bhanot, D. (2013). Kaip skaityti chromatogramą? Gauta iš: lab-training.com
  2. Carey, F. A. (2006). „Organic Chemistry Sixth Edition“. Mc Graw kalnas
  3. Šiandien chromatografija. (2014). Kas yra Chromatograma? Gauta iš: chromatographytoday.com
  4. Mathias, J. (2018). Pradedančiųjų vadovas: kaip interpretuoti dujų chromatografijos masės spektrometrijos rezultatus. Gauta iš: innovatechlabs.com
  5. Ispanijos chromatografijos ir susijusių metodų draugija. (2014). Chromatograma. Susigrąžinta iš: secyta.es
  6. Vikipedija. (2019). Popieriaus chromatografija. Gauta iš: wikipedia.org